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簡要描述:TargPurfy AF M1免疫親和柱:黃曲霉毒素 M1 免疫親和柱,適用于各類基質(zhì)復(fù)雜樣品(各種谷物、各類食品、各種飼料)中黃曲霉毒素 M1 的靶向精準提取凈化。小柱中包含一種高效價、高純度單克隆抗體,對黃曲霉毒素 M1 有特異性選擇。
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TargPurfy AF M1免疫親和柱
黃曲霉毒素 M1 免疫親和柱,適用于各類基質(zhì)復(fù)雜樣品(各種谷物、各類食品、各
種飼料)中黃曲霉毒素 M1 的靶向精準提取凈化。
小柱中包含一種高效價、高純度單克隆抗體,對黃曲霉毒素 M1 有特異性選擇。
操作流程(按國標方法GB 5413.37-2010)
1、樣品提取
1.1 液態(tài)乳、酸奶樣品處理
※ 精密稱取1g試樣于具塞離心管中,加10mL甲醇,渦旋3min;
※ 置于4℃、6000r/min下離心10min或過玻璃纖維濾紙;
※ 上清液或濾液轉(zhuǎn)移至燒杯中,加40mL水或PBS稀釋;
※ 全部樣品過免疫親和柱凈化。
1.2 乳粉、特殊膳食用食品 樣品處理
※ 精密稱取1g樣品,加入4mL預(yù)熱到50℃的純凈水,渦旋混勻至乳粉*溶解;
※ 冷卻至20℃后,加10mL甲醇,渦旋3min;
※ 置于4℃、6000r/min下離心10min或過玻璃纖維濾紙;
※ 上清液或濾液轉(zhuǎn)移至燒杯中,,加40mL水或PBS稀釋;
※ 全部樣品過免疫親和柱凈化。
1.3 奶油 樣品處理
※ 精密稱取1g樣品于離心管中,加入8mL石油醚,待奶油溶解;
※ 加入9mL水和11mL甲醇,振蕩30min,將全部液體移至分液漏斗中;
※ 加入0.3g氯化鈉充分搖動溶解,靜置分層后,取下層溶液;
※ 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至10mL以下,用PBS緩沖液(PH=7.4)稀釋至30mL,混勻;
※ 全部樣品過免疫親和柱凈化。
PBS配置:
0.20g KH2PO4+2.92g Na2HPO4•12H2O+8.0g NaCl+0.20gKCl 蒸餾水900mL溶解后,用鹽酸調(diào)節(jié)pH=7.4,
再加水定容至1000mL
2、過柱凈化
※ 將50mL SPE空柱管通過SPE轉(zhuǎn)接頭連接于免疫親和柱上端;
※ 處理好的樣品液以1~2滴/秒的速度通過免疫親和柱,棄掉流出的液體;
※ 用10mL水淋洗免疫親和柱,棄去流出液;
※ 利用真空設(shè)備抽干免疫親和柱1min;
※ 用乙腈(或甲醇)2mL×2淋洗免疫親和柱和空柱管兩次,收集全部洗脫液;
※ 在50℃氮氣下吹至近干(約100-200μL),用初始流動相定容至1.0mL,渦旋
30s溶解殘留物,0.22/0.45μm濾膜濾過,收集續(xù)濾液上機檢測。
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